顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器，是研究植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織特征和器官構(gòu)造的重要的和不可取代的工具。我們必須很好地掌握顯微鏡的構(gòu)造、使用方法及注意事項(xiàng)并學(xué)會(huì)zui起碼的維修保養(yǎng)顯微鏡的知識(shí)，以延長(zhǎng)它的使用時(shí)間。

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：

1．了解顯微鏡的構(gòu)造及其維護(hù)方法。

2．初步掌握顯微鏡的使用方法，明確使用中的注意事項(xiàng)。

二、實(shí)驗(yàn)材料：紅綢制片，“上”字制片。

三、實(shí)驗(yàn)儀器：顯微鏡。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法：

一 顯微鏡的構(gòu)造和性能：

顯微鏡的種類很多，可分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡兩大類。

光學(xué)顯微鏡是以可見光作光源，用玻璃制作透鏡的顯微鏡?？煞譃閱问斤@微鏡與復(fù)式顯微鏡兩類。單式顯微鏡結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，常用的有如擴(kuò)大鏡，由一個(gè)透鏡組成，放大倍數(shù)在10倍以下。結(jié)構(gòu)稍復(fù)雜的單式顯微鏡為解剖顯微鏡，也稱實(shí)體顯微鏡，是由幾個(gè)透鏡組成的，其放大倍數(shù)在200倍以下。擴(kuò)大鏡和解剖顯微鏡放大的物像都是直立的虛象。

復(fù)式顯微鏡結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，至少由兩組以上的透鏡組成，放大倍數(shù)可達(dá)1250倍，zui高分辯力為0.2微米（1微米=1/1000毫米）。是植物形態(tài)解剖實(shí)驗(yàn)zui常用的顯微鏡。

電子顯微鏡是以電子束作光源的顯微鏡。其以特殊的電極和磁極作為透鏡代替玻璃透鏡，能分辯相距2埃（A）左右的物體（1埃=1/10000微米），放大倍數(shù)可達(dá)80-120萬倍，分辯力比光學(xué)顯微鏡大1000倍，是了解超微世界的重要的精密儀器。

雖然顯微鏡種類很多，每一種又有若干型號(hào)，但其基本構(gòu)造是一樣的。（如圖1-1為單筒復(fù)式顯微鏡，圖1-2為雙筒復(fù)式顯微鏡）。

顯微鏡的構(gòu)造可分為保證成象的光學(xué)系統(tǒng)和用以安裝光學(xué)系統(tǒng)的機(jī)械部分（圖1：1-2）。

1．機(jī)械部分：

⑴鏡座和鏡柱：鏡座為顯微鏡的底座，支持整個(gè)鏡體，使之放置穩(wěn)定。鏡柱是鏡座之的短柱形物，支持鏡體上部的各部分。

⑵ 鏡臂：是鏡柱上面的弓形部分，為手提之處，連接并支撐鏡筒、載物臺(tái)等機(jī)械部分。在單筒復(fù)式顯微鏡鏡臂的下端與鏡柱連接處有一活動(dòng)關(guān)節(jié)，稱傾斜關(guān)節(jié)，可使顯微鏡在一定的范圍內(nèi)后傾，便于觀察。

⑶ 鏡筒：是一中空的金屬圓筒，其上端放置目鏡，下端與物鏡轉(zhuǎn)換器相連，并使目鏡和物鏡的配合保持一定的距離，一般是160毫米，有的是170毫米。鏡筒可借助鏡臂上調(diào)節(jié)輪的作用，靈活地上下移動(dòng)，用以調(diào)焦。其作用是保護(hù)成象的光路與亮度。

⑷ 物鏡轉(zhuǎn)換器：為一金屬圓盤，位于鏡筒下方，由兩個(gè)凹面向上的金屬圓盤構(gòu)成。上盤固定在鏡筒下方，下盤與上盤相連，下盤上有3-4個(gè)螺旋圓孔，以安裝不同倍數(shù)的物鏡，下盤中央有一螺旋與上盤相連，可以轉(zhuǎn)動(dòng)，以更換物鏡。當(dāng)物鏡固定在使用的位置上時(shí)，可保證物鏡與目鏡的光線合軸。

⑸ 載物臺(tái)：為圓形或方形平臺(tái)，是放置玻片標(biāo)本的地方，臺(tái)中央有一個(gè)圓形通光孔，光線由通光孔下方的反光鏡反射上來。臺(tái)上安裝有平臺(tái)移動(dòng)器，既可固定標(biāo)本，又可通過其螺旋，前后左右移動(dòng)標(biāo)本。

⑹ 調(diào)節(jié)輪：裝置在鏡臂兩側(cè)，分大小兩種，大的為粗調(diào)節(jié)輪，向內(nèi)或向外轉(zhuǎn)動(dòng)一周，可使鏡筒上升或下降0.1厘米，使用低倍物鏡觀察材料時(shí)必須用其校準(zhǔn)焦距；小的為細(xì)調(diào)節(jié)輪，旋轉(zhuǎn)一周鏡筒升降0.1毫米，使用高倍物鏡觀察材料時(shí)用其調(diào)焦。

2．光學(xué)部分：

光學(xué)部分包括物鏡、目鏡、聚光器、反光鏡等。物鏡和目鏡直接參與顯微鏡的成像，聚光器和反光鏡起調(diào)節(jié)光強(qiáng)度和改變?nèi)肷涔獾淖饔茫▓D1-3）。

⑴ 物鏡：

物鏡也叫接物鏡（或鏡頭），它由1~5組透鏡組成，其功能是聚集來自標(biāo)本的光線，使標(biāo)本*次放大成一個(gè)倒立的實(shí)像。

A．放大倍數(shù)：

一般物鏡的放大倍數(shù)都在鏡頭上注明：從3×到100×，常用的低倍鏡為10×，高倍鏡為40×，油鏡頭為100×，放大倍數(shù)的計(jì)算方法：

物鏡的放大倍數(shù)=相當(dāng)?shù)墓鈱W(xué)筒長(zhǎng)/物鏡的焦距

（光學(xué)筒長(zhǎng)=物鏡上焦點(diǎn)平面到目鏡下焦點(diǎn)平面的距離）

b．工作距離：

是指物鏡zui下面透鏡的表面到蓋玻片上表面之間的距離。物鏡的放大倍數(shù)越大，它的工作距離越小。低倍鏡的工作距離為6.5毫米，高倍鏡為0.6毫米，而油鏡頭僅為0.2毫米，使用時(shí)要倍加注意。

C．焦點(diǎn)深度：

是指視野中垂直范圍內(nèi)所能清晰觀察到的界限。在用不同倍數(shù)的物鏡觀察物體時(shí)，所能看到垂直的清晰范圍是不同的。物鏡的倍數(shù)越大，焦點(diǎn)深度越淺。

D．分辨力：

是分辯被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的能力，也就是判別兩個(gè)物體點(diǎn)之間zui短距離的本領(lǐng)。是衡量顯微鏡質(zhì)量?jī)?yōu)劣的主要根據(jù)。分辨力與鏡口率（又稱數(shù)值孔徑）關(guān)系很大，鏡口率越大，分辯率越高，物鏡的價(jià)值也就越高。

（鏡口率：是被檢物體與物鏡之間介質(zhì)的折射率與鏡口角正弦的乘積，N.A=hsinx）

分辯力：低倍鏡為1μm，高倍鏡為0.42μm，油鏡為0.22μm。

⑵ 目鏡：

也叫接目鏡，其作用是將由物鏡放大的倒立實(shí)像放大成一個(gè)正立的虛像。目鏡僅起放大物像的作用，并不增加顯微鏡的分辨力。一般目鏡有數(shù)個(gè)，它的放大倍數(shù)分別是5×，7×，10×，15×等。

⑶ 聚光器：

安裝在載物臺(tái)下，一般由2~3個(gè)凸透鏡組成，上面的透鏡是平面的。它的功用是收集從光源射來的平行光線，并匯集成光束，集中在一點(diǎn)，以增強(qiáng)照明度，再經(jīng)過被檢物體照射到物 鏡中去。利用齒輪和齒條升降，能調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱，使物像明晰。

⑷ 虹彩光圈：

裝在聚光器之下，由一片壓一片的鐵片組成。調(diào)拔操縱桿可以改變光圈的大小，調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱。有的顯微鏡在載物臺(tái)下安裝有盤光闌，它是一片有數(shù)個(gè)口徑大小不同并可轉(zhuǎn)動(dòng)的金屬圓盤。它旋轉(zhuǎn)時(shí)，可以調(diào)節(jié)下方反射來的光線強(qiáng)弱，以適于被檢標(biāo)本的要求。

⑸ 反光鏡：

安裝在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向轉(zhuǎn)動(dòng)，它的作用是把光源射出的光線反射至聚光器或通光孔。它分平、凹兩面，凹面鏡有聚光作用，在光源微弱時(shí)使用，如光源充足則用平面鏡。