伙計(jì)們，我又來(lái)了~

   

本期給大家?guī)?lái)顯微鏡物鏡的知識(shí)。

   

地球上的每個(gè)人都知道什么是物鏡。~

   

物鏡是顯微鏡的靈魂，物鏡是影響清晰度的*重要部分。

   

   

選擇物鏡時(shí)需要考慮以下問(wèn)題：

   

1、放大倍數(shù)需要多大？

   

● 物鏡可根據(jù)其放大率分為三類(lèi)。包括：低倍物鏡(2x、4x/5x和10x)，中倍物鏡(20x、40x)和高倍物鏡(60x/63x、100x)。除了物鏡的放大率不同外，物鏡的介質(zhì)也不同。例如，對(duì)于高倍鏡頭(60x和100x)，通常使用浸油來(lái)獲得高分辨率?？諝獗挥米鞣糯舐瘦^低的鏡頭的介質(zhì)。

   

2、選擇哪種觀察方法？

   

● 顯微物鏡的類(lèi)型很多，應(yīng)用場(chǎng)景也不一樣。根據(jù)觀察方法的不同，有不同的類(lèi)型。物鏡的觀察方法通常標(biāo)記在物鏡的外殼上。

   

● BF：明場(chǎng)；DF：暗場(chǎng)；PH：相差；PO：偏光；DIC：微分干涉；FL：熒光觀察(藍(lán)、綠、紫等)；UVFL：紫外熒光觀察。

   

3、如何選擇成像效果好的物鏡？

   

● ①選擇具有平場(chǎng)矯正功能的物鏡，即標(biāo)有平場(chǎng)矯正功能的物鏡Plan。②成像效果主要根據(jù)色差校正能力來(lái)判斷：消色差物鏡（Achro ** tic）：紅藍(lán)光的色差只能校正。半復(fù)消色差物鏡（FL）：紅、綠、藍(lán)三色光的色差可以校正。全復(fù)消色差物鏡（Apo）：紅、綠、藍(lán)三色光的色差可以校正兩次，紅、藍(lán)兩色光的球差可以校正。

   

● 透明切片可選擇平場(chǎng)消色差物鏡（Ach）。熒光可以選擇半復(fù)消色差物鏡（FL），而且工作距離長(zhǎng)，可以看玻片或者培養(yǎng)皿。如果需要更好的成像效果，可以選擇全復(fù)消色差物鏡（Apo），但Apo物鏡工作距離不長(zhǎng)，只適用于玻片，不適用于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等厚樣品。

   

   

4、分辨率的要求是什么？

   

● 顯微鏡的分辨率是兩點(diǎn)之間的*小距離，分辨率越小，分辨率越高。（NA與分辨率成正比，NA = n * sin α。與放大率成正比，與景深成反比。在相同的放大倍數(shù)下，NA值越高越好。滿(mǎn)足工作距離時(shí)選擇NA物鏡值高。

   

   

5、工作距離需要多長(zhǎng)？（WD）

   

● 可分為：①物鏡：工作距離小，可觀察切片，但不能觀察培養(yǎng)皿。②長(zhǎng)工作距離物鏡：用于倒置顯微鏡，可滿(mǎn)足組織、懸浮液等材料的鏡檢。

   

   

6、玻片或培養(yǎng)板的厚度是多少？

   

● 標(biāo)記物鏡光學(xué)類(lèi)型的背面（∞/0)(210/0)，也就是說(shuō)，斜杠后面的數(shù)字代表了玻璃的厚度，（∞/0.17）(210/0.17)，玻片厚度適用0.17毫米。如果使用不合適的蓋玻片，則會(huì)出現(xiàn)明顯的球差(不同角度的光不會(huì)聚集在同一高度)，從而降低成像的對(duì)比度和分辨率。NA物鏡值越高，對(duì)蓋玻片的厚度越敏感，所以要選擇正規(guī)的蓋玻片。NA值的物鏡和長(zhǎng)工作距離的物鏡可以用可調(diào)蓋玻片厚度調(diào)節(jié)環(huán)矯正不同厚度的玻璃，可以用來(lái)觀察培養(yǎng)皿。觀察時(shí)，可以調(diào)整到相應(yīng)的培養(yǎng)皿厚度，或者使用共聚焦培養(yǎng)皿，中間厚度也是0.17。